今天考无忧小编给大家分享一下临床医学检验重点，有了它，考试拿高分就变得轻而易举了！
卫生高级职称考试——临床医学检验重点
【1】
硫嘌呤甲基转移酶实验结果的临床意义是什么：
如果患者没有可检测到的TPMT活性，服用硫嘌呤药物时有可能会出现严重的副作用。通常，医生可以通过这个试验找到合适的治疗药物。
血中TPMT活性低，患者的副反应也会较轻，例如脱发、胃痛、腹泻、胰腺炎等。在这种情况下，医生会减少硫嘌呤的用药剂量。
如果患者血TPMT活性正常，就可以使用硫嘌呤药物标准剂量进行治疗。
【2】
接种乙肝疫苗不产生抗体的原因有哪些？
接种乙肝疫苗是预防乙肝的最好措施，接种成功的标志是乙肝表面抗体（抗—HBs）转为阳性。可是。经常会出现这种情况：疫苗按规定时间接种了3次，但几个月后复查乙肝病毒五项指标（俗称两对半），疫苗效果如同泥牛入海无影无踪——乙肝表面抗体始终不产生。为此，有不少人感到疑惑和恐惧——不打疫苗不行，打了疫苗又没反应。生活中乙肝病毒无处不在，少了“防弹衣”，面对乙肝病毒的“枪林弹雨”不就要坐以待毙了吗？
注射疫苗后不产生抗体的原因比较复杂，大概有以下几种情况：
◆检测方法不精确｜实际已产生抗体，但因检测方法不精确而致结果阴性。这时应当用最灵敏的方法，如酶联免疫法或放射免疫法来重新检测。因为有的地方检测方法不先进或不灵敏而得出假阴性结果。
◆免疫反应太弱
机体对疫苗的免疫反应太弱，只产生微量的抗体，以至用先进的检测方法仍未能发现表面抗体的踪迹。这时可加大乙肝疫苗的剂量（每次10微克），每月注射1次，共3次。同时，注射乙肝疫苗合用其他免疫刺激药物，如猪苓多糖、卡介苗等，被认为可以提高免疫效果。
◆已发生隐匿性感染
如按规定时间接种后仍不产生表面抗体，则可应用PCR（体外核酸扩增技术）方法检测被接种者血清中的乙肝病毒核酸（HBV—DNA）。因为，有少数病人实际上已感染了乙肝病毒，但其乙肝表面抗原（HBsAg）的产量很少，用现有的检测方法查不出来，或者乙肝病毒已经发生变异，与普通试剂不发生反应，另外还可能有其他原因。这些病人虽然已感染了乙肝病毒，但不产生免疫反应而机体呈免疫耐受状态，在这种情况下，再注射乙肝疫苗，也不会产生表面抗体。或可检测其他肝病毒标志物，如核心抗体（抗HBc）、e抗体、e抗原等是否为阳性。如果为阳性则说明感染了病毒，在这种情况下，再注射乙肝疫苗也可能不会产生抗—HBs.有乙肝家族史或经常和乙肝患者接触的人，应特别注意乙肝疫苗的接种效果。乙肝家庭成员感染乙肝病毒的几率极高，有一些成员感染乙肝病毒后，至现出隐匿状态。乙肝患者所生的子女，在出生后一定要及时注射乙肝疫苗，这样可以阻断大部分乙肝病毒的传播。但是，即便是及时注射乙肝疫苗，仍会有极少数新生儿免疫接种失败，这可能与母体孕期宫内感染乙肝病毒和遗传因素有关。对此家长不必大惊小怪，也不要乱用药；定期复查，注意肝功能变化至关重要。
◆免疫功能低下、免疫缺陷者
有类似情况的人不易产生抗体，如晚期肾病、器官移植后、艾滋病感染者等。
乙肝病毒容易发生变异，变异后的病毒，其生物特性有了新的变化，可使乙肝疫苗无法发挥作用。另外，一些乙肝病毒感染者，乙肝病毒表面抗原的亚型有所不同。亚型种类有多种，乙肝疫苗是针对主要的病毒亚型而设，所以难免有顾及不到的亚型，如果是较为罕见的病毒亚型，乙肝疫苗也不会有保护作用。
总之，打了乙肝疫苗不产生抗体者，可以加打一个疗程；如果还不产生抗体，应注意排除是否为隐匿性或低水平乙肝病毒感染者，以及是否存在乙肝病毒变异情况。以的复查工作须在水平较高的正规医院进行。
【3】
菌种保藏的目的、原理及常用的方法有哪些？
菌种基本原理：
微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。
低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。
菌种保藏方法大致可分为以下几种：
1.传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4—6℃冰箱内保存。
2.液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。
3.载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4.寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5.冷冻保藏法
可分低温冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。
6.冷冻干燥保藏法
先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。
有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。
三、器材
细菌、酵母菌，放线菌和霉菌；
肉膏蛋白胨斜面培养基，灭菌脱脂牛乳，灭菌水，化学纯的液体石蜡，甘油，五氧化二磷，河沙，瘦黄土或红土，冰块、食盐，干冰，95%酒精，10%盐酸，无水氯化钙；
灭菌吸管，灭菌滴管，灭菌培养皿，管形安瓿管，泪滴形安瓿管（长颈球形底），40目与 100目筛子，油纸，滤纸条（0.5×1.2cm），干燥器，真空泵，真空压力表，喷灯，L形五通管，冰箱，低温冰箱（-30℃），液氮冷冻保藏器。
【4】
菌种保藏的操作步骤、各保藏法的应用范围及优缺点
下列各法可根据实验室具体条件与需要选做。
1.斜面低温保藏法
将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至2—8℃的冰箱中保藏。
保藏时间依微生物的种类而有不同，霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2—4个月，移种一次。酵母菌两个月，细菌最好每月移种一次。
此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法，优点是操作简单，使用方便，不需特殊设备，能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。缺点是容易变异，因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的，屡次传代会使微生物的代谢改变，而影响微生物的性状；污染杂菌的机会亦较多。
2.液体石蜡保藏法
（1）将液体石蜡分装于三角烧瓶内，塞上棉塞，并用牛皮纸包扎，1.05kg/cm2>，121.3℃灭菌30分钟，然后放在40℃温箱中，使水汽蒸发掉，备用。
（2）将需要保藏的菌种，在最适宜的斜面培养基中培养，使得到健壮的菌体或孢子。
（3）用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡，注入已长好菌的斜面上，其用量以高出斜面顶端1cm为准，使菌种与空气隔绝。
（4）将试管直立，置低温或室温下保存（有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长）。
此法实用而效果好。霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死，酵母菌可保藏1—2年，一般无芽孢细菌也可保藏1年左右，甚至用一般方法很难保藏的脑膜炎球菌，在37℃温箱内，亦可保藏3个月之久。此法的优点是制作简单，不需特殊设备，且不需经常移种。缺点是保存时必须直立放置，所占位置较大，同时也不便携带。从液体石蜡下面取培养物移种后，接种环在火焰上烧灼时，培养物容易与残留的液体石蜡一起飞溅，应特别注意。
3.滤纸保藏法
（1）将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条，装入0.6×8cm的安瓿管中，每管1—2张，塞以棉塞，1.05kg/cm2>，121.3℃灭菌30分钟。
（2）将需要保存的菌种，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。
（3）取灭菌脱脂牛乳1—2ml滴加在灭菌培养皿或试管内，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。
（4）用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内，使其吸饱，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。
（5）将安瓿管放入内有五氧化二磷作吸水剂的干燥器中，用真空泵抽气至干。
（6）将棉花塞入管内，用火焰按图Ⅶ-13熔封，保存于低温下。
（7）需要使用菌种，复活培养时，可将安瓿管口在火焰上烧热，滴一滴冷水在烧热的部位，使玻璃破裂，再用镊子敲掉口端的玻璃，待安瓿管开启后，取出滤纸，放入液体培养基内，置温箱中培养。
细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏，前两者可保藏2年左右，有些丝状真菌甚至可保藏14—17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便，不需要特殊设备。
4.沙土保藏法
（1）取河沙加入10%稀盐酸，加热煮沸30分钟，以去除其中的有机质。
（2）倒去酸水，用自来水冲洗至中性。
（3）烘干，用40目筛子过筛，以去掉粗颗粒，备用。
（4）另取非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土，加自来水浸泡洗涤数次，直至中性。
（5）烘干，碾碎，通过100目筛子过筛，以去除粗颗粒。
【5】
临床实验室肿瘤游离DNA基因突变检测能力检测的方法要求
对检测方法没有限制：
（1）ARMS和数字PCR法：临床实验室需说明本实验室所有能检出的基因，并列出该基因能够检出的突变位点。要求实验室有能力正确报告检测范围内的所有突变；
（2）高通量测序：临床实验室需说明本实验室所有能检出的基因（明确至外显子、需说明突变类型），要求实验室有能力正确报告检测范围内的所有突变。
（3）其他未列出的检测方法，根据方法原理，参考以上说明。
质评样本基本信息：尽管血浆中游离DNA提取是影响检测的重要环节之一，但本次主要评价实验室对游离DNA的检测及结果报告能力。因此，本次提供的质评样本为已提取的游离DNA样本，可能包含各种常见突变类型。由于游离DNA特殊的片段分布特征，以及ctDNA浓度很低，日常检测组织样本（包括FFPE样本）的实验室请不要报名参加。
【6】
抗体纯化盐析法即饱和硫酸铵沉淀法：
该纯化方法是基于在待纯化免疫血清中加入饱和硫酸铵溶液，由于抗体也是一种蛋白质，其在水溶液中的溶解度是由其本身携带的亲水基团数和电荷数决定的，当我们向抗血清中加入饱和硫酸铵溶液后，硫酸根离子和铵根离子与抗体竞争溶液中的水分子，因为硫酸根离子和铵根离子与抗体分子相比，具有更强的亲水性，因此抗体分子表面的水化膜被破坏，同时其暴露出来的带电基团被溶液中的盐离子所中和进而导致其溶解度大大降低，依据此原理从而将其从抗血清中分离。
具体实验步骤如下：
将5ml抗血清与0.01M PBS在离心管内等体积混合，向其中加入10ml饱和硫酸铵溶液，边滴加边摇匀，然后置于2到8摄氏度静置过夜。
将步骤a：中的待分离物于离心机内离心，8000r/min离心15到20分钟，除上清。
将步骤b：中离心后的沉淀用2ml 0.01M PBS 溶解，然后缓慢加入3ml 饱和硫酸铵溶液，边滴加边摇匀，然后置于2到8摄氏度静置2小时。
将步骤c：中的待分离物于离心机内离心，8000r/min离心15到20分钟，除上清。
将步骤d：中离心后的沉淀用1.65ml 0.01M PBS 溶解，然后缓慢加入3.35ml 饱和硫酸铵溶液，边滴加边摇匀，然后置于2到8摄氏度静置2小时。
将步骤e：中的待分离物于离心机内离心，8000r/min离心15到20分钟，除上清。
将步骤f：中离心后的沉淀用1ml 0.01M PBS 溶解， 转移到MD 14000透析袋内，用0.01 M PBS进行透析，透析4次以上，每次至少1小时以上。
考无忧小编tips：
如果你的才华还撑不起你的野心，就静下心来学习；
如果你的能力还达不到你的目标沉下来历练；
如果你连拼命努力的机会都不给自己，就不要去和别人比什么天赋！
如果你连复习以上临床医学检验重点的机会都不给自己，就不要去和别人比什么成绩！
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